Vehiculización
de partículas de antígeno basado en la proteína Z del virus Junín
Cristina S
Borio, Marcos F Bilen, Marcelo Argüelles H, Sandra E Goñi, Javier A Iserte,
Glikmann Graciela y Mario Lozano E
BMC
Biotecnología 2012, 12:80 doi: 10.1186/1472-6750-12-80
Fondo
Arenavirus
matriz de proteína Z juega un papel importante en virus en principio y es capaz
de generar virus-like-partículas (VLPs) envueltos en ausencia de otras
proteínas virales. En estos VLPs, proteína Z está asociada a la superficie de
la membrana plasmática interna por su residuo miristoilo. Inducción de
florecimiento y propiedades de formación de vesículas puede ser explotado para
generar envuelto VLPs plataforma. Estas
estructuras pueden ser diseñadas para llevar antígeno específico en el lado
interior o en la superficie de VLPs.
Las vacunas
basadas en VLP son un tipo muy eficaz de vacunas de subunidades que imitan la
estructura global de las partículas de virus en ausencia de ácido nucleico
viral, no son infecciosas.
En este
trabajo se ensayó la capacidad de proteína Z del virus Junin para producir VLPs
que llevan la proteína verde fluorescente (EGFP), como un antígeno modelo.
Resultados
En este
informe, la capacidad de Junín Z proteína para producir VLPs de células 293T y
su capacidad para entregar un antígeno específico (eGFP) fusionado a Z fue
evaluado. La microscopía confocal mostró una membrana particular flexión en
células que expresan Z y un soldado por puntos de distribución en el
citoplasma. VLPs fueron detectados por (microscopía electrónica de transmisión)
TEM y se purificaron a partir del sobrenadante celular. El ensayo de protección
de proteinasa demostró la integridad VLPs y la ausencia de degradación del
antígeno fusionado, lo que indica su localización interna. Finalmente, la
inmunización de ratones con VLPs purificadas produjo títulos elevados de
anticuerpos anti-EGFP en comparación con los controles.
Conclusiones
Se demostró
que las VLP pueden ser generados a partir de células transfectadas con una
fusión virus Junin Z-eGFP proteína en ausencia de cualquier otra proteína
viral, y la capacidad de la proteína Z a apoyar fusiones en el extremo
C-terminal, sin menoscabo de su actividad en ciernes, permitiendo
vehiculización de antígenos específicos en las VLP.
ver mas en:
http://www.biomedcentral.com/1472-6750/12/80/abstract
enviado por BCM
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